有效解决RNase污染问题，使RNA完好无缺！

作者：IVD资讯

RNase污染无处不在

RNase（Ribonuclease，核糖核酸酶）是一类能够催化RNA降解为小分子RNA的核酸酶，广泛存在于真核、原核生物的所有细胞和组织中，通常有极强活性，RNA样本中微量的RNase污染足以导致其完全降解。实验室中RNase污染的主要来源有：

外源性污染源

1）实验中使用的水溶液、反应体系的各组分试剂、枪头等在内的实验耗材；

2）实验大环境的污染，RNase 存在于空气、灰尘和大多数物体表面；

3）实验人员的皮肤或唾液等。

内源性污染源

所有组织样品均含有内源性RNase。

如何从源头上避免RNase污染

RNase的无处不在，使得实验过程中，难以保存RNA样本的完整性，导致实验失败或影响RNA分析的结果。因此，从源头上避免RNase污染十分必要，一方面要严格控制外源性RNase的污染，另一方面要最大限度地抑制内源性的RNase。

控制外源性RNase污染的方法：

1. 操作人员全副武装

在实验过程中戴手套可避免源自人手的RNase污染；触摸皮肤、门把手及普通物体表面后更换手套；

2. 使用专业仪器与试剂

RNA操作专用的移液枪；使用RNase-free的枪头和离心管；使用RNase-free的化合物与试剂；

3. 选择实验操作环境

远离/遮蔽通风孔或开放窗口，走动较少的区域作为RNase-free区域；

4. 其他注意的点

在RNA提取和分析期间，不要进行其他可能引起RNase 污染的实验。

抑制内源性RNase活性的方法

1. 样本保存

组织取样后若不直接提取RNA，要及时用液氮迅速冷冻存于-80°C环境，并尽早进行实验，这样可使RNA的降解达到最少。

2. 添加抑制剂

在细胞裂解液中加入RNase 抑制剂（RNase inhibitor），使破碎细胞与灭活RNase 同步进行，最大限度地降低细胞破碎过程中所释放的RNase的活性。

RNase抑制剂可有效避免RNase污染

RNase抑制剂（RNase inhibitor，简称RNasin）是存在于人的胎盘中的一种特异性RNase抑制剂，能够特异地与RNase以非共价键结合形成复合体，造成RNase失活，从而保护RNA的完整度。目前，RNasin主要用于cDNA合成，体外转录，体外翻译，以及mRNA-protein复合物分离纯化等过程中保护RNA不被降解，还可用于特定RNase活性的鉴定等。

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